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細胞生長受溫度、滲透壓等外界因素的影響。

一般哺乳類及禽類細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度是37~38℃。溫度過高或過低都會影響到細胞的生長。

細胞在高滲溶液或低滲溶液中，可以立即發(fā)生皺縮或腫脹、破裂。理想的滲透壓因細胞的類型及種族而異，人血漿滲透壓為290mmol/L，被視為是體外培養(yǎng)人類細胞的理想滲透壓。哺乳類動物細胞的滲透壓一般為290～300mmol/L。人胚肺成纖維細胞為250～325mmol/L，鼠則為310mmol/L左右。在實際應用中，260～320mmol/L的滲透壓可適于大多數(shù)細胞。

無毒和無菌是體外培養(yǎng)細胞的首要環(huán)境條件。細胞在活體內，偶爾有細菌或有害物質入侵，因體內有強大的解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)，可將其解毒或清除，而不易受損害。但在離體的環(huán)境中，失去了防御系統(tǒng)，一旦有害物質入侵或細菌污染，可導致細胞死亡，前功盡棄。

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培養(yǎng)細胞生長過程：潛伏期→指數(shù)增生期→停滯期

細胞貼壁后經(jīng)過一個潛伏階段，才進入生長和增殖期.原代培養(yǎng)細胞潛伏期，約24-96 小時或更長, 連續(xù)細胞系和腫瘤細胞潛伏期短，僅需6-24 小時

指數(shù)增生期(logarithmic growth phase)這是細胞增殖zui旺盛的階段，分裂相細胞增多。指數(shù)增生期細胞分裂相數(shù)量可作為判定細胞生長是否旺盛的一個重要標志。一般細胞的分裂指數(shù)介于0.1%-0.5%，原代細胞分裂指數(shù)較低，而連續(xù)細胞和腫瘤細胞分裂相指數(shù)可高達3%－5%。

細胞數(shù)量達到飽和密度后，如不及時進行傳代，細胞就會停止增殖，進入停止期停滯期細胞雖不增殖，但仍有代謝活動。如不進行分離傳代，細胞會因培養(yǎng)液中營養(yǎng)耗盡、代謝產(chǎn)物積聚、pH 下降等因素中毒，出現(xiàn)形態(tài)改變，貼壁細胞會脫落，嚴重的會發(fā)生死亡，因此，應及時傳代。

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