人骨肉瘤細(xì)胞，U-2OS 簡(jiǎn)介：

細(xì)胞名稱(chēng)：U-2 OS人骨肉瘤細(xì)胞

性別：女

組織來(lái)源：骨；骨肉瘤

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞

細(xì)胞背景：J. Ponten and E. 這株細(xì)胞(原名2T)源自15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤。 與WI-38共培養(yǎng)或CF檢測(cè)SV40，RSV或腺病毒時(shí)未檢測(cè)到病毒。 1972年發(fā)現(xiàn)支原體污染并去除。 在本庫(kù)通過(guò)支原體檢測(cè)。 在本庫(kù)通過(guò)STR檢測(cè)。

培養(yǎng)條件：RPMI-1640(GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，85%；熱滅活馬血清，10%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，5%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

人骨肉瘤細(xì)胞，U-2OS 細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)隔夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)隔夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

注意事項(xiàng)：

1)收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。

2) 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

相關(guān)主要細(xì)胞株細(xì)胞系：

產(chǎn)品名稱(chēng)    簡(jiǎn)稱(chēng)    分類(lèi)   

人骨肉瘤細(xì)胞    HOS 骨，軟骨，肌肉 

人骨肉瘤細(xì)胞    U-2OS   骨，軟骨，肌肉

人成骨肉瘤細(xì)胞  MG-63   骨，軟骨，肌肉 

人骨肉瘤細(xì)胞    SW1353  骨，軟骨，肌肉 

熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞  U2OS-LucteT-on  骨，軟骨，肌肉

人骨肉瘤細(xì)胞    U2OSE6Tet6  骨，軟骨，肌肉 

人骨肉瘤細(xì)胞    SF-86   骨，軟骨，肌肉

人成骨肉瘤細(xì)胞  well2   骨，軟骨，肌肉 

人成骨肉瘤細(xì)胞  LZJ 骨，軟骨，肌肉 

人成骨肉瘤細(xì)胞  well5   骨，軟骨，肌肉 

人成骨肉瘤細(xì)胞  Saos-2  骨，軟骨，肌肉

小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞  K7M2wt[K7M2-WT] 骨，軟骨，肌肉 

大鼠骨肉瘤細(xì)胞  UMR-106 骨，軟骨，肌肉