大鼠胰島β細胞瘤細胞，ATCC RIN-m5F細胞 簡介：

產品名稱：RIN-m5F細胞

中文名稱：大鼠β胰島素瘤細胞

來源：美國ATCC

形態特性：上皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：該細胞是大鼠胰島細胞RIN-m的克隆，分泌胰島素及L型多巴脫羧酶，不產生生長激素抑制激素。

培養條件：RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

傳代方法：1:3～1:6傳代，每周換液2～3次

復蘇周期：10個工作日

代數：3-5代

運送方式：聯邦快遞

安全性：所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

大鼠胰島β細胞瘤細胞，ATCC RIN-m5F細胞接收后的操作流程與注意事項

1.如果細胞為貼壁細胞，，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基，培養3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡，請及時實驗室，技術人員會跟進解決。

2.貼壁細胞生長緩慢：適當提高血清濃度（zui高不能超過20%），或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養瓶繼續培養

3.生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養基進行培養

  常規培養傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）：

1.吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml  0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在1-2min）

2.鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?，加6~8ml *培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散

3.取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養

4.注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存

 特別注意：（如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養，建議添加雙抗培養）

1.收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養基，如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基，請在原瓶培養基中額外添加10%的血清（原瓶培養基的繼續使用時間zui長不宜超過72小時）

2.貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養箱孵育隔夜到第二天再做消化傳代，請優先選擇直徑6cm的培養皿進行傳代培養

3.如簽收時出現培養瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室。