MEF細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

上海慧穎生物常年供應(yīng)大量細(xì)胞，涉及細(xì)胞有人正常細(xì)胞，人腫瘤細(xì)胞，動(dòng)物正常細(xì)胞，動(dòng)物腫瘤細(xì)胞。細(xì)胞種類較多，本展臺(tái)無法一一體現(xiàn)，有意愿購買細(xì)胞的客戶請(qǐng)及時(shí)和銷售客服咨詢是否有您需要的細(xì)胞。

MEF細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)如下:

常見的污染如下：

1、細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，對(duì)細(xì)胞生長影響明顯。

仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠，壓力足夠！尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！

可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理

2、霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長，但時(shí)間長之后，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差，

用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。

CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí)，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后，再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節(jié)。

其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。

預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗；但細(xì)胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補(bǔ)，建議舍棄該污染細(xì)胞。，將環(huán)境*消毒，如果所有細(xì)胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個(gè)別污染，可能是操作問題，就要注意操作

3、支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測(cè)，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。

用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。Sigma公司的使用時(shí)用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。

4、黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會(huì)太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好，且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長狀態(tài)不會(huì)有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率。

5、真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會(huì)長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。

6、原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長，zui終形成惡性循環(huán)。

污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等

關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細(xì)胞），37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長 就是操作的問題。

也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（硫酸鏈霉素和氨芐青霉素）。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

1、孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒 或者 紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水

2、超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素

3、超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染

4、無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。

MEF細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞相關(guān)高品質(zhì)細(xì)胞株細(xì)胞系有：

K562    1640  10%    慢性髓原白血病    懸浮   

H128*    DMEM 10%    小細(xì)胞肺癌    懸浮,集聚   

H69    DMEM 10%    小細(xì)胞肺癌    懸浮   

HS77    DMEM 10%    小細(xì)胞肺癌    懸浮   

A549    1640  10%    肺腺癌    上皮樣   

LTEP-A2    1640  10%    肺腺癌    上皮樣   

SPC-A1*    1640  10%    肺腺癌    上皮樣   

D6    1640  10%    肺腺癌    上皮樣    

LAX    1640  10%    肺腺癌    皮樣   

NCI-H460    DMEM 10%    大細(xì)胞肺癌    上皮樣   

95-D    1640  10%    高轉(zhuǎn)移肺癌       

Calu-3    DMEM 10%    肺腺癌       

HCCLMS    DMEM 10%    肝轉(zhuǎn)移癌    上皮樣   

SMMC-7721*    DMEM 10%    肝癌    上皮樣   

BEL-7402    DMEM 10%    肝癌    上皮樣   

BEL-7404    DMEM 10%    肝癌       

BEL-7405    DMEM 10%    肝癌       

QGY-7701    DMEM 10%    肝癌       

QGY-7703    DMEM 10%    肝癌       

QGY-Q3*    DMEM 10%    肝癌    上皮樣   

HepG2    DMEM 10%    肝癌       

Hep3B    DMEM 10%    肝癌       

BGC-823    DMEM 10%    低分化胃腺癌       

SGC-7901*    1640  10%    胃癌    上皮樣   

ECA-109    DMEM 10%    食管癌       

MNK-7*    1640  10%    乳癌    上皮樣   

SK-BR-3*    1640  10%    乳腺腺癌    上皮樣   

BT-474    DMEM 10%insulin（0.2U/ml）    乳癌    上皮樣,呈片狀   

MCF-7*    1640/DMEM 10%     乳腺腺癌    上皮樣   

ZR-75-1    1640  10%    乳癌    上皮樣   

ZR-75-30    1640  10%    乳腺癌       

MDA-MB-231    DMEM 10%    乳癌    Adherent，Epithelial   

Bcap-37    DMEM 10%    乳腺癌       

MDA-MB-435S    DMEM 10%    乳腺管癌       

T47D    1640 10%Insulin (0.2U/ml)    乳腺管癌       

BT-20    1640  10%    乳癌       

HBL-100    DMEM 10%    乳腺細(xì)胞       

JEG    1640  10%    絨癌    上皮樣   

JAR    1640  10%    絨癌    上皮樣   

HeLa*    1640  10%    宮頸癌    上皮樣   

HeLa-229    1640  10%    宮頸癌       

HO-8910    DMEM 10%    卵巢癌       

C200    1640  10%    卵巢癌       

HT-29*    1640 10%    結(jié)直腸癌    Adherent，epithelial   

Sw620    DMEM 10%    結(jié)腸癌       

LoVo    1640  10%    結(jié)腸腺癌    上皮樣   

Ls-174-T    1640  10%    結(jié)腸腺癌       

HCT-8    1640  10%    回盲腸腺癌       

HCE-8962    1640  10%    盲腸未分化癌       

SHG-44    1640  10%    腦膠質(zhì)瘤    上皮樣   

U-251    1640  10%    腦星形膠質(zhì)瘤       

SK-N-SH    1640  10%    腦星形膠質(zhì)瘤       

CNE    1640  10%    鼻咽癌       

Jurkat    1640 10%    急性T細(xì)胞白血病    懸浮   

Hut102    1640  10%    人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤    懸浮   

Hut-78    1640  10%    人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤    懸浮   

HL-60*    1640  10%    人原髓細(xì)胞白血病    懸浮   

U937    1640  10%    組織細(xì)胞淋巴瘤       

Raji    1640  10%    Burkitt’s淋巴瘤       

Namalwa    1640  10%    Burkitt’s淋巴瘤       

A431    10%  F12    人表皮癌       

SH-SY5Y    MEM+F12（1:1）15%    人神經(jīng)瘤細(xì)胞       

DU145*    1640 10%    前列腺癌    Adherent，epithelial   

PC-13    1640 10%    前列腺癌       

CL1    1640 10%    前列腺癌       

ME12    1640 10%    前列腺癌       

P69    1640 10%    前列腺癌        

Tca-8113    1640 10%    舌癌    上皮樣   

KB    1640 10%    空腔表皮樣癌       

Hep-2    1640 10%    喉表皮樣癌       

ACC-2    1640 10%    腺樣囊性癌       

ACC-3    1640 10%    腺樣囊性癌       

THP-1    1640 10%    單核細(xì)胞瘤       

A375    1640 10%    惡性黑色素瘤       

T-24    1640 10%    膀胱變異細(xì)胞癌       

EJ    1640 10%    膀胱癌       

ScaBER    1640 10%    膀胱鱗癌       

PANC-1    DMEM 10%    胰腺癌       

Bxpc-3    DMEM 10%    胰腺腺癌       

EH-PAN1    DMEM+15%FBS    人原代胰腺癌        

MG-63    DMEM    骨肉瘤     貼壁生長    

U2OS    DMEM    骨肉瘤     貼壁生長    

HOS8603    DMEM(10%FBS)    骨肉瘤        

LUXL-1    IMDM    交質(zhì)瘤       

LUXL-2    IMDM    交質(zhì)瘤       

786-O        人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞        

A172        人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞        

AGS        人胃癌細(xì)胞        

AZ-521        人胃癌細(xì)胞        

SW480        人結(jié)腸腺癌細(xì)胞        

CaCo-2        人結(jié)腸癌細(xì)胞        

HGC-27        人胃癌細(xì)胞        

Hs 746T        人胃癌細(xì)胞        

MGC80-3        人胃癌細(xì)胞        

MKN-45        人胃癌細(xì)胞        

NUGC-3        人胃癌細(xì)胞       

SNU-638        人胃癌細(xì)胞        

SNU-739        人肝癌細(xì)胞        

Tca8113        人舌鱗癌細(xì)胞        

U251        人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞        

U-373MG        人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞        

U-87 MG        人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤        

OPM-2        人骨髓瘤細(xì)胞        

NCI-H929        人骨髓瘤細(xì)胞        

U266        人骨髓瘤細(xì)胞       

CAL 27        人舌鱗癌細(xì)胞       

DLD-1        人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞       

5637        人膀胱癌細(xì)胞       

SK-OV-3        人卵巢癌細(xì)胞       

GBC-SD        人膽囊癌細(xì)胞       

MKN-28        人胃癌細(xì)胞       

NCI-N87        人胃癌細(xì)胞       

QCY-7703        人肝癌細(xì)胞       

HepG2.2.15        人肝癌細(xì)胞       

HuH7        人肝癌細(xì)胞