mybiofield: 您好,我現(xiàn)在準(zhǔn)備用ELISA法夾心法測(cè)人血清中ELISA試劑盒IL-1,IL-6,CRP,TNF,但是對(duì)具體操作上海ELISA試劑盒還有些很低級(jí)的問(wèn)題,請(qǐng)問(wèn):    
1.預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度怎樣確定?梯度做幾個(gè),需要做空白孔嗎?豬ELISA試劑盒復(fù)孔要做嗎?
2.樣本的梯度作白介素ELISA試劑盒幾個(gè)?稀釋倍數(shù)確定的依據(jù)時(shí)什么ELISA試劑盒價(jià)格?
3.我測(cè)的樣本中TNF量很低,禽ELISA試劑盒國(guó)外有人用高敏試劑盒,國(guó)內(nèi)有用化學(xué)發(fā)光法,您知道有沒有更經(jīng)濟(jì)的方法?
生e網(wǎng)，多謝!
請(qǐng)問(wèn)mybiofield：
雙抗夾心法中，zui后TMB用硫酸終止，測(cè)量OD450的時(shí)候是用單波長(zhǎng)450nm還是雙波長(zhǎng)測(cè)量？如果是后者，參考波長(zhǎng)是哪個(gè)？630nm可以嗎？
我陰性陽(yáng)性血清都是從1：50開始被比稀釋，到1：25600，陽(yáng)性O(shè)D值都在1.0以上，1.7以下。陰性值在0.3以下。0.2的不多，多數(shù)在0.1及其以下。我的血清效價(jià)這么高，但是怎么OD值到不了別人說(shuō)的2或者3呢？
mybiofield：
謝謝你的幫助
我是用間接ELISA檢測(cè)人補(bǔ)體C1q 抗體，還想請(qǐng)教mybiofield
我的預(yù)實(shí)驗(yàn)是這樣的
1、用pH9.6,0.05M的碳酸鹽稀釋抗原C1q,10ug/mL,5ug/mL,2.5ug/mL
100uL/孔，4度過(guò)夜，PBST洗板三次
2、用10%的小牛血清（pH7.2的PBS），200uL/孔，37度3h,PBST洗板三次
3、加入陰陽(yáng)性血清100uL/孔，37度，2h，PBST洗板五次
4、 PBST（含1%的小牛血清）稀釋酶標(biāo)記的羊抗人IgG1:10000,1:20000, 1:40000,100uL/孔 ,37度，半小時(shí)
結(jié)果：   10ug/mL  5ug/mL  2.5ug/mL
1:10000 +   0.983  0.740  0.714
1:10000 -   0.577  0.676  0.576
1:10000空白 0.180  0.134  0.097
1:20000 +   0.508  0.506  0.367
1:20000 -   0.333  0.385  0.313
1:20000空白 0.085  0.094  0.078
1:40000 +   0.331  0.379  0.229
1:40000 -   0.233  0.303  0.261
1:40000空白0.061  0.068  0.06
請(qǐng)mybiofield幫忙分析，謝謝。用Elisa試劑盒的時(shí)候我該怎么選擇包被濃度，酶的濃度以及封閉的條件如何，多謝
mybiofield :你好
我們現(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)是從肝組織勻漿中檢測(cè)TNF-a,但好幾次預(yù)試的結(jié)果,TNF-a的含量都超過(guò)了Elisa試劑盒的上限,我們的Elisa試劑盒是從晶美買的,肝勻漿的濃度從 1:10 1:20 1:40 到1:100 1:200都沒有很大的區(qū)別,勻漿用的是PBS,勻漿方法用的是先用勻漿器研碎,再在-86度冰箱反復(fù)凍融3次,其余均嚴(yán)格按Elisa試劑盒內(nèi)說(shuō)明操作,請(qǐng)問(wèn)這可能是哪一步出了問(wèn)題?或是肝勻漿本身上海ELISA試劑盒也會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果?如何才能解決?ELISA試劑盒價(jià)格謝謝了,在線等!
mybiofield :你好
能不能說(shuō)一點(diǎn)點(diǎn)關(guān)于Elisa試劑盒保護(hù)液的配方豬ELISA試劑盒。
gsljz wrote:
請(qǐng)問(wèn)樓主：禽ELISA試劑盒我想自己做某個(gè)抗原成份的elisa試劑，ELISA試劑盒即自己包被酶標(biāo)板，沒有抗原做標(biāo)準(zhǔn)品怎么辦？白介素ELISA試劑盒是否需要去買？