CT-26細胞/ CT-26小鼠結腸癌細胞     培養步驟

產品名稱：CT-26細胞

中文名稱：小鼠結腸癌細胞；CT-26

規格：T25

形態特征：CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)誘導形成的未分化結腸癌細胞株。它克隆形成的細胞株命名為CT26.WT (ATCC CRL-2638)。 用包含編碼典型腫瘤相關抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆轉錄病毒載體LXSN穩定轉染CT26.WT，得到致死的亞克隆CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)。即使CT26.CL25表達了典型的TAA beta-半乳糖苷酶，在正常小鼠中CT26.CL25 和 CT26.WT的生長率與致死率也保持基本一致。 與CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)一起可用作測試免疫治療程序的模型，并用于研究宿主免疫反應。 2001年七月提交到ATCC的培養物污染了支原體。 其后代通過BM 細胞周期蛋白處理21天消除支原體。 處理后六周，用Hoechst染色、PCR和標準培養測試進行支原體檢測。 結果都呈陰性。

生長狀態：成纖維細胞樣

特征特性：貼壁生長

培養條件：RPMI1640+10%FBS（推薦HAKATA優等胎牛血清貨號：HN-FBS-500）

傳代方法：1：2傳代

凍存條件：HAKATA ® 無血清細胞凍存液 貨號：H-W-100 規格：100ML

支原體檢測：陰性

使用權限：A類

參考文獻：

供應商：上海慧穎生物科技有限公司

復蘇周期：10個工作日左右

培養步驟：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL*培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右*培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右*培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

慧穎生物是一家專業從事細胞培養相關產品的公司，擁有獨立細胞房（可隨時約定參觀），供應胎牛血清，無血清細胞凍存液，無血清培養基，常規培養基，胰酶，雙抗，*培養基，STR鑒定細胞，感受態細胞等，專業，專注，性價比高，是您Shou選之家。

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H054    GES-1   人胃正常黏膜上皮細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H055    IOSE80 人卵巢正常上皮細胞株    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H056    GIST882 人胃腸道間質瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H057    KGN 人卵巢顆粒細胞癌    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H058    U937    人組織細胞淋巴瘤細胞    RPMI-1640 +10% FBS  懸浮    單核細胞樣

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H060    tpc-1   人乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H061    hela-luci   Luciferase穩定表達Hela細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H062    colo320 人結腸癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  圓形

H063    bxpc-3  人胰腺腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H064    raji    人Burkitt's淋巴瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞樣

H065    5637    人膀胱癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H066    chang-liver 人肝細胞(已被hela污染）    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

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H068    hs578.t 人乳腺癌細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼壁    上皮細胞樣

H069    T24 人膀胱移行細胞癌細胞    McCoy's +15%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H070    K562    人慢性髓系白血病細胞    IMDM+10% FBS    懸浮    淋巴母細胞樣

H071    EH-GB1  人膽囊癌細胞（表達GFP和RED2）  DMEM+15% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H072    skov-3  人卵巢腺癌細胞  McCoy's +15%FBS   貼壁    上皮細胞樣

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H074    nci-n87 人胃癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H075    B-CPAP  人甲狀腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H076    NCI-H1975   人非小細胞肺腺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H077    HK-2    人腎皮質近曲小管上皮細胞    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H078    J82 人膀胱癌細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H079    A431    人皮膚鱗癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H080    MG63    人骨肉瘤細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H081    SW48    人結腸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H082    ME180   人宮頸表皮樣癌  McCoy's +10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標記的人肝癌細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H084    BEAS-2B 人正常肺上皮細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人髓系白血病單核細胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    單核細胞樣

H086    PC9 人肺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

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H088    Huh7    人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H089    Hcc9810 人肝癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1    人急性T淋巴細胞白血病細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞樣

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H094    CAL27   人口腔鱗癌  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

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H096    hne1-lmp1   轉入LMP1基因人鼻咽癌細胞   RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H097    nci-h226    人肺鱗癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

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